雙縮脲試劑優缺點

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雙縮脲試劑是需要其中的銅離子與肽鍵反應,本來這種物質是用來鑒定雙縮脲的,因為雙縮脲和蛋白質都具有肽鍵所以也可以用來鑒定蛋白質,那么雙縮脲試劑優缺點有哪些呢?下面就一起隨小編來了解一下吧。

雙縮脲(NH3CONHCONH3)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產物,在強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物,雙縮脲反應產生的紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。

雙縮脲試劑的優點

雙縮脲法測定蛋白質測定范圍能夠是1~10mg蛋白質,操作簡單、快捷。既適合手工操作,又適合自動化分析,重復性好、線性關系好, 雙縮脲試劑可以長期保存( 若貯存瓶中有黑色沉淀出現,則需要重新配制)。

雙縮脲試劑的缺點

靈敏度差,測定范圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質產生顏色的深淺相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精確的蛋白質測定。 干擾測定的物質包括有:在性質上是氨基酸或肽的緩沖液,如TrIs緩沖液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉淀。

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